在臨床實驗室，操作感染性標(biāo)本時或作病原體分離培養(yǎng)、制備菌種時會因為樣品的振蕩、搖動、傾注、攪拌、移液等操作或液體的灑落，產(chǎn)生肉眼看不見的直徑<5／zrn的氣溶膠或產(chǎn)生直徑為5～100腫的液滴，這些微粒中含有活的致病微生物，可以**作者吸入或污染工作臺面上的其他樣品。生物**柜是一種設(shè)備，它的作用就是有效地降低實驗室獲得性感染的機(jī)會，減少人與樣品或樣品與樣品之間交叉污染的機(jī)會，用于保護(hù)操作人員，保護(hù)實驗室環(huán)境，保護(hù)實驗材料的生物**。

生物**柜的種類及特點

1.Ⅱ級生物**柜

Ⅱ級生物**柜又稱為層流生物**柜。與工級生物**柜不同之處是進(jìn)入

的空氣先經(jīng)HEPA過濾，保證覆蓋臺面上的空氣是無菌的，不僅提供個人防護(hù)，也保護(hù)樣品不受污染。Ⅱ級生物**柜共分Ⅱ級A和Ⅱ級B型2種，又可進(jìn)一步再分為Ⅱ級A ?、Ⅱ級A ?Ⅱ級B ?、Ⅱ級B?型。Ⅱ級生物**是自遏型的。流動空氣中的70％可以反復(fù)循環(huán)再利用。此種生物**柜適合于細(xì)胞或組織培養(yǎng)、接觸2～3級危險等級病原體的操作，如果穿正壓防護(hù)服可在Ⅱ級生物**柜上從事接觸4級危險等級感染因子的操作。

(1)Ⅱ級A型生物**柜

Ⅱ級A型生物**柜(圖1)有1個內(nèi)置風(fēng)機(jī)將實驗室空氣以0．38 m／s

的速率吸入**柜，通過HEPA濾器后向下，在距工作臺表面6．18 cm處分開，一半通過前面的排風(fēng)格柵，另一半通過后面的排風(fēng)格柵。所有實驗中產(chǎn)生的氣溶膠或液滴均被向下氣流帶走。氣流經(jīng)排出通道到達(dá)**柜頂部的2個HEPA濾器之間，此時，約70％的氣體經(jīng)供風(fēng)HEPA過濾器重新返回柜內(nèi)操作區(qū)域被再利用，其余30％的氣體經(jīng)排風(fēng)過濾器后被排到實驗室再反復(fù)利用，或通過建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到外界。

3.生物**柜的通風(fēng)連接

Ⅱ級A1型和A2型外排式生物**柜有“套管式”或“傘形排氣罩式”的連接。套管安裝在**柜的排風(fēng)管上，將**柜內(nèi)排出的氣體，引入建筑物的排氣系統(tǒng)。在套管與**柜排風(fēng)管之間留有1個直徑差為2．5 cm的開口，以便讓實驗室內(nèi)的空氣一起抽人建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)中。建筑物的排風(fēng)能力必須能滿足房間和柜中排風(fēng)的要求。套管必須是可拆卸的或設(shè)計成可對生物**柜進(jìn)行操作測試類型。通常，建筑物氣流的波動對套管式連接的生物**柜的功能不會有太大的影響。

Ⅱ級B1和B2型生物**柜通過硬管，亦即沒有任何開口地、牢固地連接到建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)，或者好是連接到專門的排風(fēng)系統(tǒng)。建筑物排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)量和靜壓必須與生產(chǎn)商所指定的要求正好一致。對硬管道連接的生物**柜進(jìn)行認(rèn)證時，要比將空氣再循環(huán)送回房間或采用套管連接的生物**柜更費(fèi)時。

4.生物**柜的選擇

購買生物**柜時應(yīng)考慮所提供的生物防護(hù)作用是針對操作人員個人的還是針對實驗樣品的；若是針對操作人員的防護(hù)應(yīng)明確是針對病原微生物的還是針對有毒化學(xué)物質(zhì)或兩者兼而有之。若是針對病原微生物的還應(yīng)強(qiáng)調(diào)微生物的生物危害級別；若是針對有毒化學(xué)物質(zhì)的可按照以下原則作選擇：工級或Ⅱ級A型生物**柜中不進(jìn)行揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)操作。Ⅱ級B1型生物**柜只可用于少量的揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)的操作，如要進(jìn)行一定量的揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)的操作必須使用Ⅱ級B2型生物**柜。不同型別的生物**柜排氣特點不同，見表1。

生物**柜的正確使用和安放

1．安放

進(jìn)入生物**柜的空氣速率約是0．45 m／s，按照這種速率，氣流的完整性很容易受附近人員的走動、窗戶的開關(guān)、門的開啟和關(guān)閉、空調(diào)運(yùn)行等因素的影響。為避免上述因素的干擾，生物**柜應(yīng)放在遠(yuǎn)離人員活動、物品流動以及可能會擾亂氣流的地方。為了方便起見，應(yīng)在**柜的后面、左右兩側(cè)面各留30 cm的空間，以利于**柜的維護(hù)。上端應(yīng)留30～35 cnl空間，以便準(zhǔn)確測量空氣通過排風(fēng)過濾器的速度及排風(fēng)過濾器的更換。

2．操作人員

使用生物**柜時，操作人員手臂的伸入或取出時應(yīng)緩慢，垂直于前端開口處，從而保證**柜前端氣流的完整性。應(yīng)在手或胳膊伸入柜中1 min后開始操作，以便**柜對手或胳膊表面的空氣進(jìn)行凈化處理。實驗所需器材應(yīng)一次性放人生物**柜，盡量減少或限制操作人員手在**柜中的進(jìn)出次數(shù)。

3．實驗材料的放置

Ⅱ級生物**柜前端開口處嚴(yán)禁被紙張、設(shè)備或其他物品覆蓋。物品放人生物**柜后，表面要用70％的乙醇擦拭。柜內(nèi)應(yīng)備有1塊浸過**劑的毛巾，以便蘸吸濺出的液體。實驗材料盡量放在柜的后面，笨重的物品放在一邊，產(chǎn)生氣溶膠的物品也應(yīng)放在柜的后面。實驗器材應(yīng)按順序從清潔的排放到污染的。污染的實驗材料不。應(yīng)隨時拿出柜外，操作者的手也不應(yīng)頻繁地進(jìn)出**柜。

4．操作和維持

大多數(shù)的生物**柜設(shè)計成**24 h開機(jī)，調(diào)查發(fā)現(xiàn)連續(xù)開機(jī)有利于控制實驗室灰塵和粒子。Ⅱ級A型不用時可以關(guān)閉。Ⅱ級B型在使用時要保持實驗室空氣平衡，因此**中若有數(shù)個操作過程，其間不應(yīng)中斷運(yùn)行。實驗開始前5 rain就應(yīng)啟動生物**柜，凈化局部空氣。使用中若出現(xiàn)任何故障均應(yīng)及時向上級人員報告并請專職技術(shù)人員維修。

5．紫外線

生物**柜中不需要紫外燈。假女盯要用，每周應(yīng)對燈管作清潔，除去塵埃，保證**效果。應(yīng)定期監(jiān)測紫外燈的輻射強(qiáng)度。要防止紫外線對眼睛或皮膚的灼傷。

6．明火

生物**柜內(nèi)近似無菌的環(huán)境中應(yīng)避免使用明火，一方面它可干擾氣流運(yùn)行，其次，若操作中使用揮發(fā)性或易燃物質(zhì)時會造成危險。操作時需用接種環(huán)的，盡可能地用一次性的塑料接種環(huán)，使用金屬接種環(huán)的應(yīng)該用微型燃燒器或電爐**而不應(yīng)該使用明火。

7．溢出

在實驗室工作的每一個人都應(yīng)熟知含微生物的樣品溢出時的處理程序。一旦生物**柜中發(fā)生有生物危害的物品溢出時，應(yīng)在**柜處于工作狀態(tài)下立即進(jìn)行清理。要使用有效的**劑，并在處理過程中盡可能減少氣溶膠生成。實驗完畢后，柜中所有接觸病原體的材料均應(yīng)作****處理。

8．清潔和**

工作完畢后，柜中所有的物品都應(yīng)**表面污染并移出柜外，柜內(nèi)工作臺表面和柜的內(nèi)壁應(yīng)用含氯石灰(漂白粉)或70％乙醇**。若用腐蝕性的化學(xué)劑**后還應(yīng)用**水再擦洗。關(guān)機(jī)前應(yīng)運(yùn)行5 min，以便對殘留氣體進(jìn)行凈化。

9．**污染

濾膜更換之前生物**柜要由專業(yè)人員用甲醛熏蒸**。

10．個人防護(hù)設(shè)施

使用生物**柜的操作人員應(yīng)穿工作服。在生物**1～2級實驗室中工作的人員可穿普通的工作服；在3～4級實驗室工作的人穿反背式實驗隔離衣具有更好的保護(hù)效果。手套應(yīng)能包住腕關(guān)節(jié)上的防護(hù)服。有些操作可能要戴口罩和眼罩。

11．警報

生物**柜有發(fā)出1種或2種警報的功能。一當(dāng)窗框移動時，警報會響，表明操作者將窗框移到一個不合適的地方去了，糾正以后警報解除。氣流警報表明柜中正常氣流運(yùn)行模式中斷，對操作者的保護(hù)作用和對樣品防污染的作用減至低，存在危險。警報響時，應(yīng)立即停止工作并迅速報告上級人員。作為制造商，在產(chǎn)品的使用說明書的操作部分應(yīng)詳細(xì)論述這一內(nèi)容，對有關(guān)人員使用生物**柜的培訓(xùn)材料中也應(yīng)有此內(nèi)容。

12．生物**柜的認(rèn)證

每臺生物**柜功能的完整性和操作的有效性能都應(yīng)作檢定。安裝時應(yīng)按國家或國際標(biāo)準(zhǔn)檢定，以后應(yīng)根據(jù)制造商說明書定期由專職技術(shù)人員檢定。對生物**柜使用有效性的評價應(yīng)包括以下內(nèi)容：功能完整性實驗，HEPA濾器密封性試驗，對向下氣流速度、正面氣流速度、負(fù)壓／換氣次數(shù)、氣流的煙幕模式，以及警報和互鎖系統(tǒng)進(jìn)行測試。還可選擇漏電、光照度、紫外光輻射強(qiáng)度，噪音級別，振動性等試驗。檢測人員要經(jīng)過專門的培訓(xùn)，采用專門的技術(shù)和儀器設(shè)備。建議由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進(jìn)行測試。

對醫(yī)學(xué)實驗室的管理人員而言，正確選擇生物**柜的類型，合理安放，正確使用，每年認(rèn)證是一·個復(fù)雜但又必要的過程。這些活動應(yīng)在有經(jīng)驗并訓(xùn)練有素的專家的指導(dǎo)下進(jìn)行。這些專家應(yīng)熟悉相關(guān)文獻(xiàn)，受過與生物**柜有關(guān)方面的培訓(xùn)。作為操作人員則應(yīng)在使用前接受操作、保養(yǎng)、維護(hù)的正規(guī)培訓(xùn)。